smok ความเคลื่อนไหวรูปร่างของนิวโทรฟิล ความ

smok
smok

ความเคลื่อนไหวรูปร่างของนิวโทรฟิล smok ความมีชีวิต แล้วก็การแสดงออกของ CD11b แล้วก็ CD66b
นิวโทรฟิลถูกเพาะที่ 5 × 10 5เซลล์ต่อหลอดโพลีโพรพิลีนแล้วก็บ่มด้วย ECVE (0.001–0.1 OD) ตรงเวลา 2, 4 หรือ 6 ชั่วโมง (ความเคลื่อนไหวรูปร่างรวมทั้งการแสดงออกของ CD11b แล้วก็ CD66b) หรือ 6 ชั่วโมง (การมีชีวิต) ใน 5 % CO 2ความชุ่มชื้นในบรรยากาศ 37 °C เซลล์ถูกล้างใน PBS และก็ตระเตรียมสำหรับโฟลว์ไซโตเมโทรี เนื้อหาอยู่ในไฟล์เพิ่มเติมอีก3

MMP-9 รวมทั้ง CXCL8 เปิดตัว smok
นิวโทรฟิลถูกเพาะที่ 1 × 10 5เซลล์ต่อหลุมในจาน 96 หลุมตูดแบนและก็ฟักด้วย ECVE, CSE (0.001–0.1 OD) หรืออะโครลีน (สิกข์มา-อัลดริช) ตรงเวลา 6 ชั่วโมงในบรรยากาศความชุ่มชื้น CO 2 5% ที่ 37 องศาเซลเซียส ส่วนลอยเหนือขี้ตะกอนถูกนำออกรวมทั้งพินิจพิจารณาสำหรับ MMP-9 และก็ CXCL8 โดยการทดลองด้วยโปรตีนที่ทำหน้าที่เร่งปฏิกิริยาเคมีที่เชื่อมโยง immunosorbant (ELISA; R&D Systems, Abingdon, UK) ตามคำแนะนำของผู้สร้าง สารเหนือขี้ตะกอนยังคงใช้เพื่อวัดกิจกรรมของ MMP-9 โดยไซโมกราฟฟีและก็ระดับ MMP-9 โดย western blot เนื้อหาอยู่ในไฟล์เสริมเติม3

สำหรับเพื่อการศึกษาเล่าเรียนที่ตรวจตราผลการบำบัดรักษาด้วยยาต่อการปลดปล่อย MMP-9 ที่รั้งนำโดย ECVE (0.003 OD) นิวโทรฟิลถูกบำบัดรักษาล่วงหน้าด้วยการควบคุมด้วยกระสายยา (DMSO 0.005%) ตัวยับยั้ง p38 MAPK BIRB-796 (1 ไมโครโมลาร์; Sigma-Aldrich) ERK 1/2 inhibitor selumetinib (1 μM; Stratech Scientific Ltd, Newmarket, UK) หรือ dexamethasone (1 μM; Sigma-Aldrich) ตรงเวลา 1 ชั่วโมงก่อนฟักตัวด้วย ECVE MMP-9 ถูกวัดโดย ELISA

กิจกรรม NE
นิวโทรฟิลถูกเพาะที่ 1.4 × 10 5เซลล์ต่อหลุมในจาน 96 หลุมตูดแบนรวมทั้งบ่มด้วย ECVE (0.001–0.1 OD) ตรงเวลา 6 ชั่วโมงในบรรยากาศความชุ่มชื้น CO 2 5% ที่ 37 °C ดูดซับสเตรตที่มีโรดามีน 110 เป็นหลักฐาน (R6506 Invitrogen) ถูกเพิ่มเติมก่อนจุดจบ 30 นาทีภายหลังที่วัดการเรืองแสงโดยใช้เครื่องอ่านเพลตโอเมก้า FLUOstar ที่การปลดปล่อย 485 นาโนเมตร 520 นาโนเมตร (BMG Labtech, Buckinghamshire, UK)

About the Author

You may also like these

No Related Post